Sanger双脱氧链终止法测序利用的原理是()。
Sanger双脱氧链终止法测序利用的原理是()。
A.特定化学试剂对不同碱基进行特异性修饰并在修饰的碱基处打断磷酸二酯键
B.ddNTP在DNA合成过程中不能形成磷酸二酯键,诱导合成终止
C.dNTP在DNA合成过程中不能形成磷酸二酯键,诱导合成终止
D.dNTP在溶液中的浓度不同
正确答案:B
Sanger双脱氧链终止法(也称为二代测序或传统测序)是一种测序技术,其原理是利用特定的二脱氧核苷酸(ddNTP,双脱氧核苷三磷酸)作为反应体系中的核苷酸。在这个方法中,DNA合成过程中的ddNTP会随机地取代普通的dNTP(脱氧核苷三磷酸)进入新合成的DNA链中。一旦ddNTP被加入到DNA链中,由于它缺少3'羟基,无法形成磷酸二酯键,因此导致DNA链的延伸终止。这样在反应的终止位置,可以确定所加入的ddNTP所对应的碱基,从而获得目标DNA片段的序列信息。通过多次重复这一反应,以覆盖整个DNA片段,就可以得到完整的DNA序列信息。
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